贝壳粉的美容功效浙江蓝联科技有限公司

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浙江省分析测试科技计划研究项目珍珠粉和贝壳粉的气质联用鉴别方法研究项目 工作总结报告 计划编号：2009F70064 起止年月：2009 委托单位：浙江省科技厅承担单位：浙江万里学院 2011 项目立项背景珍珠粉是天然珍珠用物理方法加工制成的白色、类白色粉末，作 为传统的中药，一直受到人们的关注。随着现代科技的迅猛发展，珍珠粉成分和结 构的奥秘得以进一步的揭示，研究表明珍珠粉含有丰富的营养成分和生命源物质， 具有增强免疫力，补充钙质，改善睡眠、治疗溃疡、养肝明目，辅助降压，葆春延 衰，美容美白等重要功效。正因为珍珠粉具有如此多的功效，目前，以珍珠粉为原 料的医药、美容、化妆等新产品不断开发，使珍珠粉的需求量进一步增加。很多不 法商人也借机掺杂以获取更高的利益，因此，寻找一种准确、快速的检验和鉴别珍 珠粉的方法具有十分重要的现实意义。 目前，在珍珠粉中掺杂最多的两种粉末是滑 石粉和贝壳粉，尤其以贝壳粉居多。而鉴别真伪珍珠粉的方法主要有三大类：一是 性状鉴别，二是普通理化鉴别，三是用仪器鉴别，但到目前为止，还没有一种方法 能准确、快速地检验、鉴别珍珠粉和贝壳粉，因此进行此方面的研究具有很重要的 现实意义。

有研究指出，珍珠粉和贝壳粉除含有蛋白质、氨基酸等大分子有机物外， 还含有许多小分子有机物，这些有机物正是珍珠粉和贝壳粉两者药用功效有所区别 的主要原因之一。但这部分有机成分含量微小，难以用传统的方法测定其含量和结 构，所以具体的分离测试极少见报道。 基于上述理论依据，项目组申报了珍珠粉和 贝壳粉的气质联用鉴别方法研究项目，核心内容就是利用气质联用技术定性确认和 定量检测珍珠粉和贝壳粉的小分子有机物，指认两类粉末的关键成分差别，进而建 立气质色谱检验、鉴别珍珠粉和贝壳粉的方法。2009 年12 月，本项目 获得浙江省 科技厅大型科学仪器设备协作共用平台科技计划资助。通过近两年的研究工作，本 项目完成了预定目标，现将本项目研究工作具体总结如下。2 项目主要研究内容 珍珠粉和贝壳粉的化学成分和结构特征分析以我国浙江诸暨淡水养殖珍珠的珍珠 粉和贝壳粉为例，采用重铬酸钾容量－稀释热法、全自动凯氏定氮法、原子吸收光 谱法、离子色谱法、红外光谱法、荧光光谱法等对其化学成分和结构特征进行系统 分析，为后续样品的预处理和气质联用法测定珍珠粉和贝壳粉的有机成分奠定基础。 （2）珍珠粉和贝壳粉中小分子有机物的提取方法的研究 本项目用两大类方法提取 各种珍珠粉和贝壳粉中的小分子有机物。

一是先将珍珠粉和贝壳粉去钙化，然后选 择合适的溶剂萃取钙化后固体物质中的小分子有机物，研究的重点是钙化剂和提取 溶剂的选择。二是不对珍珠粉和贝壳粉进行去钙化处理，原位提取两类粉末中的微 量有机成分，拟采用的提取方法是索氏提取法和 CO2 超临界萃取法。研究的重点 是索氏提取溶剂的选择和超临界萃取条件的选择。 （3）珍珠粉和贝壳粉中小分子 有机物的 GC-MS 测定条件选择 珍珠粉和贝壳粉中小分子有机物经气相色谱分离 后进质谱系统测定。研究的重点是分离柱和程序升温等色谱分离条件的选择。 各种珍珠粉和贝壳粉的小分子有机物的定性和定量分析分别比较不同提取条件下 珍珠粉和贝壳粉有机成分的区别，比较选定两类粉末有机成分提取的最佳方法。在 此条件下测定各种珍珠粉和贝壳粉有机成分，找出两类粉末的关键成分差别，并以 标准物质定量，测定各种珍珠粉和贝壳粉的主要小分子有机物的含量，建立检验和 鉴别珍珠粉和贝壳粉气质联用色谱法。3 项目预期目标 （1）技术经济指标：建立 检测成本低、快速的检验、鉴别珍珠粉和贝壳粉的方法体系。 （2）获取自主知识 产权：在国内外核心期刊上发表 项目组成员与分工项目组织实施过程中本着优势集成、分工协作的原则由项目 组负责人总体负责项目的实施、协调各研究方向的集成与合作。

项目组成员和具体 分工如下： 夏静芬：项目负责人，全面负责研究方案设计、实施；周旭章、汪财生： 研究珍珠粉和贝壳粉微量有机成分提取方法；蔡艳、唐力：GC-MS 测定条件的选 择以及微量小分子有机成分的分析；钱国英：协助数据分析。2 项目实施方法 本项 目首先全面分析珍珠粉和贝壳粉的化学成分和结构特征，在此基础上研究珍珠粉和 贝壳粉中小分子有机物的提取方法，同时选择分离柱、程序升温等 GC-MS 测定条 件，在选定色谱条件下测定不同提取方法得到的微量小分子有机物，比较选定两类 粉末有机成分提取的最佳方法。在此提取条件下，测定各种珍珠粉和贝壳粉有机成 分，鉴定两类粉末的关键成分差别，并定量测定珍珠粉和贝壳粉特征小分子有机物 的含量。3 项目研究实施结果 。并在 项目实施完成后已完成项目合同书中提及的 所有研究目标（详见项目合同书）原有计划的基础上全面分析了珍珠粉和贝壳粉的 化学成分和结构特征（详见项目研究报告）。3.1 项目研究结果 （1）珍珠粉和贝 壳粉的化学成分和结构特征分析 测定了珍珠粉和贝壳粉的钙、碳酸根、有机质、氨 基酸和蛋白质等含量，结果表明这些成分含量与多种因素有关，不宜作为区分两者 的依据。

红外光谱显示珍珠粉和贝壳粉的主要成分均为文石型碳酸钙，两者角壳蛋 白红外吸收峰型基本相似，仅在 2131.3cm-1 处存在差异，经 400加热 30min 珍珠粉和贝壳粉的有机质均基本分解；加热90min 之后珍珠粉碳酸钙的晶型开始 发生转变，由文石型向方解石型转化，至 180min 转化完成；贝 至壳粉加热 15min 之后碳酸钙的晶型已由文石型开始向方解石型转化， 30min 转化即完成。这说明 贝壳粉文石碳酸钙的稳定性比珍珠粉低的多。 （2）珍珠粉和贝壳粉中小分子有机 物的定性分析 用索氏提取法、CO2 超临界萃取法和溶剂溶解萃取法等方法提取后， 在选定的色谱条件下，比较珍珠粉和贝壳粉的有机成分区别。研究结果表明珍珠粉 和贝壳粉经索氏提取、CO2 超临界流体萃取和溶剂溶解萃取后用气质联用色谱法分 析微量有机成分，发现珍珠粉和贝壳粉中所共同含有的物质有 C8H11N、C11H16、 C11H10、C16H22O4、C19H32、C24H38O4；还可能共同存在的有机物有 C10H14、 10H8、 12H14O4、 16H13N、 16H20、 18H35NO、 18H35N、 CC17H36等；珍珠粉和贝壳粉中含量最多的有机物为 C16H22O4 C24H38O4（PAEs）。

比较三种萃取有机物方法的分析结果可知，去钙化后再用溶剂溶解萃取法萃取的可 能存在有机物数目比索式提取法与 CO2 超临界提取法略多，可能是该法将珍珠粉 和贝壳粉的主要成分碳酸钙溶解后，更有利于有机成分的提取。 （3）珍珠粉和贝 壳粉中邻苯二甲酸酯含量定量测定 建立了 CO2 超临界流体萃取-气质联用测定珍 PAEs含量的方法，该方法回收率在 89.25115.2之间，平行样品中 PAEs 的相对标准偏差＜6。测定结果表明珍珠粉 DMP 含量为 47.25-141.4g/kg， 贝壳粉为 93.49-197.4g/kg；珍珠粉 DBP 含量为332.1-401.6g/kg，贝壳粉为 201.2-883.1g/kg；珍珠粉中 DEHP 含量为 344.1-402.8g/kg，贝壳粉为 111.3-480.4g/kg。 建立了固相微萃取-气质联用测定珍珠粉和贝壳粉浸出液中 PAEs 含量的方法，通过响应面曲线法优化了 100-mPDMS 纤维萃取 DBP 的最佳条件， 分别为萃取温度 45，萃取时间 51min，解析时间 5.24min。在此条件下，珍珠粉 和贝壳粉样品浸出液中 DMP 的最高含量为 4.46310-3 ug/kg，DEP 2.74510-3ug/kg，DBP 3.99910-1ug/kg，DEHP为1.87910-2 ug/kg，BBP 1.72910-1ug/kg。

3.2项目研究物化成果 本研究项目的物化成果包括三项，分别为： （1）项目研究报告一份（详见项目研究报告） （2）发表学术性论文 篇，文章分别名为《傅立叶变化红外光谱法对珍珠粉和贝壳粉 、的研究》《傅立叶变化红外 光谱法对珍珠粉和贝壳粉的研究》和《响应面法优化固相微萃取饮用水中的邻苯二 甲酸二正丁酯》 ，文章发表于《光谱实验室》《化学研究与应用》以及《环境科学与技术》（详见项目发表的学术论文） 一种珍珠粉和贝壳粉的鉴别方法（发明人钱国英、夏静芬、陈亮），专利号ZL 2.X，授权公告日 2011 月。3.3项目研究成果分析 通过对项目实施 计划目标和实际完成内容的对比不难发现：项目组基本完成了项目实施计划的内容 并在此基础上对研究内容进行了进一步的扩展和研究，在物化成果方面我们发表了 目实施计划目标与实际完成内容比较分类 序号 项目实施计划目标 实际完成内容 采用重铬酸钾容量－稀释热法、 全自动凯氏定氮法、原子吸收光 谱法、离子色谱 法、红外光谱法、 研究 荧光光谱法等对其化学成分和结结果 构特征进行系统 分析，掌握了珍 珠粉和贝壳粉的化学成分和结构 特征分析区别。

（1）珍珠粉和 贝壳粉小分子 用索氏提取法、CO2 超临界萃取 有机物的提取方法。 法和溶剂溶 解萃取法等方法提取 （2）珍珠粉和贝壳粉中小分 后，在选定的色谱条件下，比较 子有机物的GC-MS 测定条件 机成分区研究 选择。 别。初步确定了各种提取方法的 结果 （3）珍珠粉和贝壳粉的小分 差别以及珍珠 子有机物的定性分析。要小分子有机物。 定量测定了珍珠粉和 贝壳粉中含 珍珠 粉和贝壳 粉小分子 有机 量最高的PAEs（全量和水溶性含 物的定量测定。 完成项目研究 总结报告 完成了项目研究总结报告和工作 作总结报告各一份。总结报告各一份。 物化 完成与项目有关的学术论 完成并发表了与项目有关的学术成果 项目实施体会与建议从本项目研究结果看， 珍珠粉和贝壳粉化学成分含量与多种因素有关，不宜作为区分两者的依据。400加 热后，两种粉末文石碳酸钙的稳定性差异非常大，可用于珍珠粉和贝壳粉的鉴别。 比较不同方法提取珍珠粉和贝壳粉有机物的结果发现去盐酸钙化后再用溶剂溶解萃 取能提取到的有机物种类最多，珍珠粉和贝壳粉的共同含有的物质有 C8H11N、 C11H16、C11H10、C16H22O4、C19H32、C24H38O4 等，其中 C16H22O4 C24H38O4含量最高。

定量测定结果表明研究样品中 DMP、DBP DEHP含量 较高。 作为进一步的研究，本项目组根据研究结果做出如下建议： （1）建立淡水 贝类产品 PAEs 的标准分析方法。 （2）选择不同地域、不同水体及不同生长期贝 类为材料，运用建立的分析测定方法进行评价，并同时对养殖贝类水体 PAEs 进行 测定，分析淡水贝类与养殖水体之间的污染相关性和贝类对 PAEs 的富集能力。三、 技术创新点和技术解决方案 在珍珠粉和贝壳粉的化学成分和结构特征分析过程，发现经 400加热 30min 加热90min 之后珍珠粉碳酸钙的晶型开始发生转 变，珍珠粉和贝壳粉的有机质均基本分解；由文石型向方解石型转化，至 180min 化完成；贝壳粉加热15min 之后碳酸钙的晶型已由文石型开始向方解石型转化， 30min转化即完成。即 400加热后，两种粉末文石碳酸钙的稳定性差异非常 大，可用于珍珠粉和贝壳粉的鉴别。 确认了珍珠粉和贝壳粉小分子有机成分，建立了 CO2 超临界流体萃取-气质联用测定珍珠粉和贝壳粉中 PAEs 含量和固相微 萃取-气质联用测定珍珠粉和贝壳粉浸出液中 PAEs含量的方法，并定量测定了样品 DEHP的含量。

四、科技成果转化、产业化经费投入情况，包 括总经费和科研经费投入情况 总经费 万元，目前研究经费共计使用2.6298 元，具体如下：：18070 专用材料费（设备费和材料费）管理费：1500 费使用符合科技经费使用范围。五、成果转化、产业化完成的技术和经济社会效益指标 建立了检验、鉴别珍珠粉和贝壳粉的方法（专利号 ZL 2.X，授 权公告日2011 月），该方法具有检测成本低、快速与推广应用的价值。发表 了三篇与项目有关的学术论文，分别为《傅立叶变化红外光谱法对珍珠粉和贝壳 粉的研究》《傅立叶变化红外光谱法对珍珠粉和贝壳粉的研究》和《响应面法优化固相微萃取饮用水中的邻苯二甲酸二正丁酯》 ，文章发表于《光谱实验室》《化学研究与应用》以 。及《环境科学与技术》